Dispensador de parafina
Para la inclusión de muestras histológicas a observar al microscopio óptico, se utiliza como medio de inclusión parafina y, en menor medida, celoidina.
La parafina es una sustancia cerosa formada a partir de mezclas de hidrocarburos saturados. A temperatura ambiente es sólido y su punto de fusión puede variar entre 40°C y 70°C dependiendo de la composición de la mezcla de hidrocarburos. Así, las parafinas más duras a temperatura ambiente tienen un punto de fusión más alto, mientras que las más blandas tienen un punto de fusión más bajo. Se recomienda una mayor dureza para incluir muestras más duras. Las parafinas más utilizadas tienen un punto de fusión de unos 60°C. Las características de las parafinas se pueden modificar añadiendo sustancias para variar su dureza, viscosidad, fragilidad, etc.
Características
La parafina es inmiscible con agua, mientras que todos los tejidos están formados principalmente por agua. Además, la mayoría de los fijadores son soluciones acuosas. Esto implica que para que la parafina líquida penetre completamente en el tejido, el agua debe ser reemplazada por un solvente orgánico. Esto se logra deshidratando el tejido en alcoholes, generalmente etanol. La deshidratación debe ser completa, de lo contrario afectará a la posterior infiltración de parafina. Luego el tejido se transfiere a un líquido miscible tanto con alcohol a 100°C como con parafina, denominada sustancia intermedia, como benceno, xileno, tolueno u óxido de propileno, entre otras. Estas sustancias aclaran normalmente, por lo que al comprobar la translucidez de la pieza, podemos asegurar la penetración de la sustancia intermedia en los tejidos. El tiempo de incubación de la pieza en alguno de estos líquidos intermedios como el tolueno o el xileno no debe ser excesivo ya que estas sustancias endurecen la pieza y crean problemas a la hora de realizar los cortes.
tejido de parafina
Finalmente, el tejido de parafina previamente licuado se pasa por un horno regulado a la temperatura adecuada para dicho tipo de parafina. Se toman tres medidas por parafina líquida para promover el reemplazo completo del líquido intermedio con parafina. La duración de estos pasos depende de la volatilidad del líquido intermedio y del tamaño de nuestra moneda. Cuanto más volátil sea el líquido intermedio o más grande la muestra de tejido. Ten en cuenta que un tiempo excesivo de parafina puede endurecer la tela. Sin embargo, los efectos de una mala infiltración pueden ser más perjudiciales que mantener las muestras en parafina líquida durante mucho tiempo. Una vez finalizada la inclusión, se vierte parafina líquida en un molde,
Otras características a considerar
El dosificador de parafina es el equipo que se utiliza para incrustar la muestra de parafina. En este proceso el objetivo es colocar las diferentes muestras de tejido en moldes metálicos llenándolos con parafina líquida a una temperatura de 55-60°C, luego colocándolos en una cámara refrigerada a -4°C hasta que la parafina se endurezca, listo para usar. llegar a recibir las copas.
En la rutina histológica se utilizan dos tipos de parafinas: La parafina blanda, cuyo punto de fusión está entre 42 y 46°C, se utiliza durante la pre-impregnación para que los tejidos comiencen a infiltrarse rápidamente con esta parafina, debido a: que tiene una viscosidad más baja. Posteriormente, las muestras se sumergen en un baño de parafina dura (punto de fusión: 56° a 58°C), cuyo grado de dureza es mayor y que facilita el corte del micrótomo. Al embeber en parafina, se debe recordar que el lado de la muestra a observar bajo el microscopio debe estar en contacto con el fondo del molde.
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